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乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)试剂盒的原理是利用酶免疫分析(ELISA)技术检测血液中是否存在HBsAg。该试剂盒通常包括一种特异性抗体,将其固定在微孔板上形成“捕获层”。样本被加入后,如存在HBsAg则会与捕获层中特异性抗体结合。接着,另一种标记有酶的抗体被加入,这种抗体也特异性地与HBsAg结合。最后,一种能够与酶反应的底物被加入,产生信号使得检测结果可见。
一、组成:
试剂盒组成48孔配置96孔配置保存
说明书1份1份
封板膜2片2片
密封袋1个1个
酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存
标准品0.3ml×6管0.3ml×6管2-8℃保存
酶标试剂5 ml×1瓶10 ml×1瓶2-8℃保存
样品稀释液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存
显色剂A液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存
显色剂B液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存
终止液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存
20×浓缩洗涤液15ml×1瓶25ml×1瓶2-8℃保存
注:标准品浓度依次为:
二、样本处理及要求:
1.样本收集:采用洁净无菌的方法采集血清样本,避免污染。
2.样本储存:将样本保存在-20°C以下的冰箱中,避免重复冻融。
3.样本处理:样本在室温下解冻,并在离心机中离心,去除沉淀和杂质。
4.样本稀释:根据试剂盒说明书,将样本按照比例稀释到适当浓度后再进行检测。
5.操作规范:操作过程中要严格按照试剂盒说明书进行操作,避免误差和污染。
6.结果读取:根据试剂盒说明书,对反应结果进行正确的读取和判定。
三、操作步骤
1.取出所需的试剂盒,并将其室温平衡30分钟。
2.根据样本类型和体积,向试管或微孔板添加相应的样本。
3.加入稀释缓冲液使样品达到合适的浓度。混匀后孵育一定时间。
4.将试剂盒中的洗涤缓冲液加入每个孔中,充分洗涤后弃去。
5.加入试剂盒中的酶标记试剂,混匀后再次孵育。
6.再次加入洗涤缓冲液,洗涤后弃去。
7.加入底物溶液,再次孵育后观察结果或使用检测设备读取结果。
具体的操作步骤可能因试剂盒品牌和型号而略有不同,建议按照试剂盒说明书上的指导进行操作。同时,为确保实验准确性和安全,请遵守实验室相关规章制度和操作规程。
四、注意事项:
1.乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)试剂盒应在严格的实验室条件下操作。
2.操作前应检查试剂盒的有效期和贮存条件是否符合要求。
3.操作前应准备好所有必要的材料和设备。
4.操作时应遵循试剂盒说明书中的步骤和操作规程。
5.应避免交叉污染,例如使用单一样本处理区域、单一吸头等。
6.避免与其他化学品混合,以免影响试剂盒结果。
7.报告结果时应结合临床症状和其他检测结果进行分析。
五、计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
六、试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内变异系数与批间变异系数应分别小于10%和15%。
检测范围:
灵敏度:
保存条件及有效期:
1.试剂盒保存:2-8℃。
2.有效期:6个月
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https://www.chem17.com/st483348/product_376311981.html